荷蘭PamGene公司和上海埃飛電子科技公司強強合作!為全面的激酶活性分析平臺可為廣泛的應用提供新的機會,這些應用可洞察疾病的分子機制并導致發(fā)現生物標志物。PamGene的許多應用都在腫瘤學領域,而在神經生物學、心血管生物學和免疫學等其他疾病領域也出現了新的應用。
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PamGene使用專有的3D肽微陣列技術( PamChip?和PamStation?),該技術為全局激酶活性分析提供了多種方法。 該測定非常靈敏,僅需少量裂解液即可測量各種樣品(包括細胞系,異種移植物和人體組織)中激酶的活性。 從幾千個細胞中獲得的裂解物足以獲得這些樣品中存在的多種激酶的動力學特征。這是通過將樣品裂解物與固定在微陣列3D表面上的144個酪氨酸或144個絲氨酸/蘇氨酸激酶肽底物一起孵育來實現的。 裂解物中存在的激酶會磷酸化肽底物,可使用熒光標記的抗體檢測到。
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實驗室工作流程:
激酶測定工作流程(圖3a-c)包括3個步驟:( 1)樣品制備(細胞或組織裂解); ( 2)使用我們專有的Evolve軟件進行PamChip?檢測; ( 3)使用我們專有的BioNavigator軟件進行數據分析和知識整合。 在測定過程中,樣品溶液被泵送通過多孔膜,從而實現更快的動力學和實時測量。當溶液在陣列下方時,工作站中的CCD相機會在幾個曝光時間拍攝每個陣列的圖像(圖3d)。圖像隨后由BioNavigator?軟件使用,以生成每種肽的動力學數據曲線(圖3c)。 使用BioNavigator?軟件執(zhí)行的數據工作流程包括圖像量化,質量控制,統(tǒng)計分析,可視化和解釋。
該產品獨有的特色:
1、廣泛的覆蓋范圍– 380種磷酸用于覆蓋激酶組的大部分。2、基于激酶活性– 可以測量對激酶的直接抑制劑作用。
3、靈敏– 僅需要少量蛋白質輸入(每個陣列0.5至5μ g),因此使該測定比其他方法更為靈敏。4、無特異性抗體– 數據質量不依賴于磷酸抗體的特異性,因為特異性源自380個磷酸位點。
5、全長激酶– 我們可以從幾種細胞系和組織的裂解物中測量全長蛋白的激酶活性,而其他基于重組的激酶活性測定法則無法提供這種活性。
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